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細(xì)菌回復(fù)突變(Ames)試驗(yàn)

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項(xiàng)目詳情
  一,定義
 
  細(xì)菌回復(fù)突變(Ames)試驗(yàn)用于檢測DNA損傷引起的基因突變,通過檢測受試物在測試菌株某些特殊構(gòu)建的突變體上引起突變的能力,即造成菌株從組氨酸/色氨酸依賴型向原養(yǎng)型突變,判斷受試物是否為致突變劑。
 
  試驗(yàn)需在加和不加s9代謝活化系統(tǒng)條件下同時(shí)進(jìn)行。在培養(yǎng)細(xì)菌的瓊脂培養(yǎng)基中加入痕量的組氨酸或色氨酸,允許細(xì)菌前幾個(gè)小時(shí)生長,表現(xiàn)為背景菌苔。當(dāng)加入的組氨酸/色氨酸用盡后,只有發(fā)生了突變的細(xì)菌才可以繼續(xù)生長成為肉眼可見的回復(fù)突變菌落。
 
  二,不同類型的Ames試驗(yàn)
細(xì)菌回復(fù)突變(Ames)試驗(yàn)
 
  人用藥物注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會(huì)議ICH推薦的標(biāo)準(zhǔn)遺傳毒性試驗(yàn)組合:
 
  組合一
 
  1.細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn);
 
  2.體外染色體畸變試驗(yàn)、體外微核試驗(yàn)或體外小鼠淋巴瘤tk試驗(yàn),任選一個(gè);
 
  3.體內(nèi)微核試驗(yàn)、體內(nèi)骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn);動(dòng)物給藥后取外周血淋巴細(xì)胞做細(xì)胞遺傳學(xué)分析也可接受,但不常用。
 
  組合二
 
  1.細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn);
 
  2.用兩種不同組織做體內(nèi)遺傳毒性評(píng)估,包含體內(nèi)微核試驗(yàn)和另一個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)。第二個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)通常選擇評(píng)估動(dòng)物肝臟DNA鏈斷裂;
 
  3.細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)是與致癌物檢測最相關(guān)的體外試驗(yàn)。

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